coniugato con la perossidasi alcalina.

Credo sia F(ab')2 realmente...



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Note added at 23 mins (2012-10-30 14:33:19 GMT)
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FOSFATASI alcalina (e non perossidasi scusami!)

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Note added at 25 mins (2012-10-30 14:35:11 GMT)
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This kit is intended for the detection of bound fluorescein-conjugated oligonucleotide probes. This kit comprises affinity-purified rabbit F(ab') anti-fluorescein isothiocyanate conjugated to alkaline phosphatase (Vial A), enzyme substrate (Vial B), and levamisole (Vial C).

From: http://www.vectorlabs.com/catalog.aspx?prodID=1238

Quindi F(ab') (non 2)

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Note added at 1 day8 hrs (2012-10-31 22:23:08 GMT)
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Complementi di informazione:

1/ Il testo originale dice: affinity-purified rabbit F(ab') anti-fluorescein isothiocyanate conjugated
Prima di tutto ricordo la struttura degli anticorpi: http://it.wikipedia.org/wiki/Immunochimica

2/ Due parole sono qui FONDAMENTALE: “anti” e “conjugated”
a/ anti è anti-fluorescein isothiocyanate quindi non è anti altra cosa che l’isotiocianato di fluoresceina !
b/ conjugated è “conjugated to alkaline phosphatase” quindi il coniugato è la fosfatasi alcalina !
La traduzione diventa quindi “facile” : anti-isotiocianato di fluoresceina coniugato con fosfatasi alcalina

3/ Un anticorpo, e peggio un Fab (molto più ridotto) non può avere un “doppio” coniugato: è coniugato con A, B o C ! Basta vedere la struttura al punto uno per capire che il coniugato da “attaccare” è uno solo; non serve la laurea in chimica !
Qualsiasi anticorpo interro, ovvero con Fc, e peggio se è solo il Fab, ha un solo sito al quale legare un coniugato ! Non esistono anticorpi con 2 coniugati attaccati ! Magari fosse; potrebbe tornare utile ! Ma la struttura molecolare è tale da consentire un solo linker !
4/ Una doppia marcatura è una tecnica che usa 2 anticorpi ! Non uno ! Il primo diretto contro (anti) la proteina A, il secondo diretto contro (anti) la proteina B; il primo è coniugato con X e il secondo con Y cosi che danno due colori diversi ! DI nuovo, non esistono anticorpi coniugati con A e B !

5/ A cosa serve questo Ac, e cioè quello di questo KIT (quello in oggetto della domanda)???
Pensate ad un laboratorio che dispone di diversi anticorpi primari, anti-A, anti-B, anti-C (A, B e C sono delle proteine, esempio, anti-Actina, anti-Beta-actina, anti-cardiolipina) tutti coniugati con l’isotiocianato di fluoresceina perché fanno saggi quantitativi di tipo ELISA ! Considerate che un primario costa circa €500/€800 !
Se questo laboratorio adesso vuole identificare su Western-blot le medesime proteine, per evidenziarne il peso molecolare e ricavarne un’altra informazione scientifica, deve comprare di nuovo 3 anticorpi coniugati con la FA o PA che viene rilevata per colorimetria (visibile all’occhio sulla membrana di WB) e non tramite lettore di fluorescenza come lo è l’isotiocianato di fluoresceina in ELISA plates ! Altre circa €2500 ! (solo per 3 proteine; pensate se avessero 20 anticorpi…… )
Ebbene, basta comprare questo KIT ! L’Ac, diretto contro, ovvero “anti” isotiocianato di fluoresceina, coniugato con la fosfatasi alcalina e il suo substrato (vial C, Levamisol) darà una bella colorazione alle vs membrane. Questo vale per tutti i vostri 3, 10, 20 anticorpi primari per ELISA marcati con l’isotiocianato di fluoresceina ! Con un solo KIT, ne leggete 20 ! E non dovete ricomprare altri 20 primarie !!! (adesso mi aspetto pure uno sconto di questa dità….!!!!)
Si usa l’Ac anti-A, B, C……coniugato con isotiocianato di fluoresceina che, alla loro volta vengono rilevato con l’Ac anti isotiocianato di fluoresceina qui in oggetto, che evidenzia sulla membrana l’anti-isotiocianato di fluoresceina poiché è coniugato con fosfatasi alcalina (FA); si da il levamisolo, substrato della FA e sulla membrana si vede la banda della proteina A, B o C !
In WB, si chiama “sandwitch” !
Quale doppia marcatura ????? è solo un WB COLORIMETRICO (con fosfatasi alcalina) che rileva un anticorpo primario fluorescente.
Del resto, basta leggere il foglio illustrativo qui sopra per vedere tutto, compreso da disegno !


Spero sia chiaro all’asker e anche a chi propone traduzione che, in biologia, non hanno alcun senso.